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基因魔剪—CRISPR/Cas9系统(四)

通过CRISPR/Cas9系统完成基因编辑/转录激活操作后,接下来至关重要的步骤就是通过实验确认基因操作的效率,是否达到我们的实验预期。目的基因是否已经被敲除(无法表达),亦或者是否已经完成转录激活,目的蛋白表达含量显著提高?这个问题解决与否直接关系到我们后续的现象与机制研究。
 
检测目的基因的转录水平变化,可通过qPCR实验分析目的基因转录的mRNA表达水平,优宁维为您提供分子生物学领域金标准品牌QIAGEN系列产品,为您提供从mRNA提取,反转录,到荧光定量PCR全套解决方案,具体产品如下:

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产品名称

用途

74104

RNeasy Mini Kit (50)

RNA提取

205311

QuantiTect Rev.Transcription Kit (50)

RNA逆转录

208054

QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500)

荧光定量PCR

 
qRCR实验检测可以从转录水平分析目的基因是或否被CRISPR系统成功调控,但分析基因表达调控,最直接的方式还是直接对目的蛋白进行定量/半定量分析,检测目的蛋白是否被敲除(无表达)或转录激活(过表达)。经典的蛋白半定量实验为蛋白免疫印迹实验(western blot,WB),通过特异性抗体,可以直观检测目的蛋白在基因编辑样本与对照样本中的表达差异,反应出基因编辑是否成功。通过WB检测目的蛋白表达水平,也是最常用的实验方式。抗体专家优宁维联合CST、R&D、GE、Millipore、Jackson、Absin、LabEx等国内外知名品牌,为您带来专业、全面、安全的一体化WB检测产品与服务,助力您的科研进程。具体产品如下:

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产品名称

用途

RIPANP40

RIPA & NP-40 Lysis Buffer

WB 样本裂解buffer

10600023

PVDF膜

WB 蛋白转印膜

多种浓度

蛋白预制胶

WB 预制胶

abs923

预染蛋白marker

WB 蛋白marker

更多产品

一抗

WB 验证抗体

更多产品

二抗

WB 二抗

abs920RPN更多产品

ECL化学发光液

ECL发光液

abs49001014

牛血清白蛋白(BSA)

封闭液BSA

 
确定了目的基因被成功调控以后,接下来就可以进行机制研究了。优宁维提供多种单/多因子检测产品与服务,方便检测信号通路、细胞因子等表达差异,助力机制研究,详情请点击以下链接了解更多
 
到这里,小优专题第二期之CRISPR/Cas9篇也要完结了,相信通过这个专题,大家对CRISPR/Cas9系统最主要的两大应用—基因剪切以及转录激活都有了较为深刻的认识,在涉及到相应的实验时,不要忘记优宁维的产品哦。优宁维为您提供全面、专业以及高质量的CRISPR/Cas9相关产品,助力科研。
 
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咨询邮箱:info@univ-bio.com      

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