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WB-显色检测

现代免疫检测方法是基于酶联检测,常见与二抗共价结合的酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。结合在二抗上的酶催化特异底物的降解而产生信号。通常使用三种类型的底物:显色、化学发光和化学荧光,也可用荧光基团标记的二抗来检测。


1.显色检测
显色检测法灵敏度通常比化学发光法至少低一个数量级; 沉淀物难以从膜上剥离,限制印迹再次用于其他蛋白的检测; 显色检测无需特殊设备,容易进行。

 

2.化学发光检测
有着显色检测的速度与安全性,灵敏度高于显色检测; 化学发光底物可兼容再次杂交; 需要特殊设备仪器进行成像。

 

3.荧光检测
成像时间短,结果可量化,可进行数字化数据储存; 荧光信号可长时间保持稳定; 采用荧光标记二抗的免疫印迹检测需要专业的仪器。

 

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